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馬原代脾臟單核原代細胞

商品屬性：

形態(tài)：
培養(yǎng)基：馬脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)環(huán)境：氣相：95%空氣+5%二氧化碳;溫度：37℃

傳代特征：可傳5代左右；3代以內狀態(tài)

細胞基本屬性：

種屬來源：馬

組織來源：馬脾臟馬脾臟

生長特性：半懸浮生長

產品規(guī)格：5×105cells/T25或1mL凍存管
換液頻率：每2-3天換液一次

消化液：

產品貨期：現貨，1周左右

運輸方式：T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞（包郵）

供應限制：僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

背景介紹：:單核細胞是血液中大的血細胞，是機體防御系統的一個重要組成部分。與其他血細胞比較，單核細胞內含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強的吞噬作用。它通過吞噬和產生抗體等方式來抵御和消滅入侵的病原微生物。               單核細胞能吞噬異物產生抗體，在機體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面起著重要的作用。機體發(fā)生炎癥或其他疾病都可引起單核細胞總數百分比發(fā)生變化，因此檢查單核細胞計數成為輔助診斷的一種重要方法。在機體的防護、免疫和創(chuàng)傷愈治過程中起協同作用。盡管它們是血液中的一類細胞成分，但它們功能的發(fā)揮，更多地體現在循環(huán)管道外的器官組織中。在功能方面它們與這些器官組織中的許多細胞成分如巨噬細胞、肥大細胞、成纖維細胞等密切相關。

原代細胞培養(yǎng)的主要步驟包括：

?一、剝離組織，去除外膜、結締組織等?：將組織從動物體中取出，并去除可能存在的外膜或結締組織等雜質。

二、?洗滌后將組織剪成1mm左右的小塊?：使用生理鹽水或其他適當的緩沖液洗滌組織，然后將其剪成約1mm大小的小塊。

三、?用0.1%～0.2%的消化?：將剪碎的組織塊加入含有0.1%～0.2%的緩沖液中，進行消化。消化時間可根據具體實驗需求選擇熱消化（37℃）或冷消化（4℃），熱消化時間短，冷消化時間長但條件更溫和。

?四、吹打分散后，過濾、計數?：將消化后的細胞吹打到一個離心管中，然后過濾、計數。

五、?按30萬/毫升分瓶培養(yǎng)?：將計數后的細胞按30萬/毫升的濃度分瓶培養(yǎng)。

細胞培養(yǎng)操作：

收貨處理取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2，飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)

傳代密度細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)

傳代代數可傳5代左右；3代以內狀態(tài)

傳代比例傳代建議1：2傳代，1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿

傳代方法：

1.吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

3.用吸管輕輕吹打混勻，按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4.待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。

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